Technical Note ◆ cd155-dnam1-competition
CD155 与 DNAM-1 交叉竞争：为什么你的 TIGIT 筛选必须加这个对照DRAFT
CD155 与 DNAM-1 交叉竞争：为什么你的 TIGIT 筛选必须加这个对照
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TL;DR
CD155 不只有 TIGIT 一个受体——它同时结合激活受体 DNAM-1（CD226）（以及 CD96）。文献报道 TIGIT 对 CD155 的亲和力高于 DNAM-1（低 nM 级 vs 更高 KD 范围，数值因方法与批次而异）。任何"阻断 TIGIT"或"靶向 CD155"的筛选，不加 DNAM-1 交叉竞争对照，就无法区分"特异性阻断"与"配体全面封堵"——两种抗体的生物学完全不同。
1. 机制（一分钟版）
CD155/PVR 是 nectin 样家族的共享配体：
| 受体 | 信号 | 与 CD155 亲和力（文献报道） |
|---|---|---|
| TIGIT | 抑制（T/NK） | 低 nM 级 |
| DNAM-1 (CD226) | 激活（T/NK） | 高于 TIGIT 的 KD 范围（更低亲和力） |
| CD96 | 调节/抑制（争议） | 视报道 |
TIGIT 与 DNAM-1 竞争同一个结合位点区域——TIGIT 高亲和"抢占"CD155 抑制激活信号。因此：
- 抗 TIGIT 抗体：阻断 TIGIT-CD155 → 释放 DNAM-1 激活（预期机制）；
- 抗 CD155 抗体：可能同时阻断 TIGIT 与 DNAM-1 通路（"配体封堵"）——治疗逻辑与 TIGIT 特异性阻断不同（尤其 BsAb 设计）。
2. 为什么筛选必须加对照
- 区分机制："我的抗体阻断 TIGIT" vs "我的抗体阻断 TIGIT 同时也灭了 DNAM-1 激活"——对免疫激活结局影响相反（文献证据不一，需实验验证）；
- BsAb 设计：靶向 CD155 的双抗需确认对 DNAM-1 通路的处置（保留 vs 阻断）；
- 排坑：很多"TIGIT 阻断"数据其实只证明了配体结合减少，未证明特异性。
3. 实验设计（竞争/交叉对照）
| 步骤 | 要点 |
|---|---|
| 结合验证 | 低密度捕获（TIGIT 或 DNAM-1）→ CD155 浓度系列 → KD（各自报告） |
| 竞争实验 A | CD155 + 抗 TIGIT 预孵育 → 注入 → 结合下降 = TIGIT 阻断 |
| 竞争实验 B（必须） | CD155 + 同一抗体预孵育 → 注入 DNAM-1 → 观察 DNAM-1 结合是否被影响 |
| 交叉矩阵 | 抗体 × {TIGIT / DNAM-1 / CD96} 三路竞争表（阻断率） |
| 对照 | isotype；无关蛋白；CD155 突变体（表位定位，可选） |
判读：
- 只阻断 TIGIT、不动 DNAM-1 → TIGIT 特异性阻断（保留激活通路）；
- 同时阻断两者 → 配体封堵型（生物学不同，需单独论证）；
- 阻断率报告：
(1 − 结合信号/对照) × 100%，与文献对照。
4. 常见错误
- 只测 TIGIT 竞争——机制结论不完整；
- 忽略 CD96——三受体竞争才完整（CD96 争议性可注明）；
- 密度过高——CD155 寡聚/亲合性伪影污染竞争读数（低密度 + SEC 单体批次）；
- 把"结合减少"当"特异性阻断"——必须做 DNAM-1 对照才能下结论。
5. 供应商 QC 要求（配对采购时）
- [ ] TIGIT–CD155 配对结合数据（KD，双向）
- [ ] CD155–DNAM-1 结合数据（交叉对照用）
- [ ] CD155 SEC 状态（单体/二聚）
- 可选：CD112（nectin-2）数据（次级配体）
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