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FcRn Hub — Antibody Half-Life & Fc EngineeringPUBLISHED
FcRn Hub — Antibody Half-Life & Fc Engineering
> 发布版（三节：biology / assay_design / faq）。完整版（protocols / product_comparison / construct_selection）在数据验证后补充。
1. Biology
FcRn（neonatal Fc receptor）是 FCGRT 与 β2-microglobulin 的异二聚体，通过pH 依赖结合决定 IgG 半衰期：内涵体酸性环境（pH 6.0–6.5）结合 IgG-Fc，中性环境（pH 7.4）释放——这一再循环机制使 IgG 半衰期达约 21 天。Fc 工程改造（延长半衰期或加快清除）本质上是调节这个 pH 开关。
- 绑定：pH 6.0 结合，pH 7.4 释放
- 关键评价：pH 6.0 亲和力 + pH 7.4 解离速率（半衰期相关）
- 相关分子：IgG-Fc、FcRn、B2M；改造策略：YTE、LS、Abdeg 等（文献报道）
UniProt 增强（DRAFT · 待审校）
- FCGRT（[P55899](https://www.uniprot.org/uniprotkb/P55899)，UniProt CC BY 4.0）：长度 365 aa；链/成熟区起点 -；功能：Cell surface receptor that transfers passive humoral immunity from the mother to the newborn. Binds to the Fc region of monomeric immunoglobulin gamma and mediates its selective uptake from milk (PubM…
- B2M（[P61769](https://www.uniprot.org/uniprotkb/P61769)，UniProt CC BY 4.0）：长度 119 aa；链/成熟区起点 -；功能：Component of the class I major histocompatibility complex (MHC). Involved in the presentation of peptide antigens to the immune system. Exogenously applied M.tuberculosis EsxA or EsxA-EsxB (or EsxA ex…
2. Assay Design（SPR 双测量）
| 步骤 | 要点 |
|---|---|
| 捕获 | biotinylated FcRn（streptavidin）或 anti-His；低密度（Rmax 30–80 RU）防亲合性伪影 |
| 结合 | pH 6.0 缓冲液，流式注入单体 IgG/Fc/Fab |
| 释放 | 切换 pH 7.4，测解离——这是半衰期相关指标 |
| 对照 | FcRn 结合缺陷突变体（如 I253A/H310A/H435A）阴性对照 |
详细方案见：[FcRn SPR 实验设计](/content/fcRn-spr-assay)
3. Construct Selection（FcRn）
3.1 关键构建参数
| 参数 | 选项 | 影响 | 怎么选 |
|---|---|---|---|
| 序列 | FCGRT aa 24–297（ECD）+ B2M 全长 | 异二聚体完整性是活性前提 | 只接受异二聚体 |
| 标签 | AVI-biotin / His | 捕获一致性与洗脱 | 动力学 → biotinylated |
| 表达系统 | HEK293（主流） | 糖基化影响小（文献报道） | HEK293 即可，声明批次 |
| 形式 | 异二聚体（FCGRT+B2M） | 单链/截短活性存疑 | COA 必须验证异二聚体 |
3.2 决策树（填空式）
- assay = {{SPR 双测量 / ELISA / 细胞}}？
- 需要 pH 依赖数据？→ 供应商必须提供 pH6.0 + pH7.4 传感图
- 突变研究（YTE/LS）？→ Custom Construct（M9 服务）
3.3 供应商必须提供的证据
- [ ] 异二聚体验证（FCGRT+B2M）
- [ ] pH 6.0 / 7.4 SPR 传感图
- [ ] 参照 IgG 结合对照
4. Product Comparison（FcRn）
4.1 格式对比
| 版本 | 适用 | 局限 | 推荐度 |
|---|---|---|---|
| biotinylated 异二聚体 | SPR/BLI 动力学（pH 双测量） | 需验证捕获活性 | ★★★★★ |
| His-tag 异二聚体 | 常规结合/ELISA | anti-His 捕获批次差异 | ★★★★ |
| Fc-fusion FcRn | 细胞实验 | 动力学禁用（亲合性） | ★★ |
4.2 与常见替代方案对比（已核实公开数据预填，价格与最新目录 M4 待复核）
| 维度 | 本平台（计划） | Sino (CT071-H27H-B) | ACRO | 差异点 |
|---|---|---|---|---|
| 形式 | biotinylated 异二聚体 | biotinylated 异二聚体，HPLC 验证（公开目录） | HEK293，SPR/BLI 验证、多物种（公开信息） | 结构等价；差异在价格与数据完备度 |
| pH 数据 | 随批次提供（承诺） | 需询价确认 | SPR/BLI 验证（公开） | M4 待复核 |
| 价格 | 待定 | 待询（M4） | 待询（M4） | — |
4.3 我的推荐（一句话）
> pH 依赖 SPR 动力学研究 → biotinylated 异二聚体（含 pH6.0/7.4 数据批次），因为双测量是 half-life 评价的关键。
6. FAQ
- Q: pH 6.0 KD 相同，半衰期就一定一样吗？ 不一定——pH 7.4 解离速率才是主要相关指标，务必双测量。
- Q: 为什么我的 KD 比 datasheet 高（弱）？ 先查表面密度（亲合性）与缓冲液 pH，再看 FcRn 是否完整异二聚体。
- Q: 用 Fc-fusion 的 FcRn 可以吗？ 会有亲合性伪影；动力学研究用单体 ECD。
- Q: biotinylated 版本为什么重要？ 捕获方向一致、基线稳定、便于批次间对比。
- Q: 我需要什么 QC 数据？ SEC 单体%、内毒素、pH6.0/7.4 SPR 传感图、异二聚体验证。
5. Protocols
- [FcRn SPR pH 6.0/7.4 双缓冲协议](/content/fcRn-spr-protocol)（文献依据·待湿实验验证）
What next?
- [Buy FcRn Protein](/request?utm_campaign=hub-fcrn&utm_source=site&utm_medium=organic&utm_content=cta-buy) — biotinylated heterodimer，含 pH 依赖 SPR 数据
- [Request a Sample](/request?utm_campaign=hub-fcrn&utm_source=site&utm_medium=organic&utm_content=cta-sample)
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