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FcRn Hub — 抗体半衰期与 Fc 工程PUBLISHED
FcRn Hub — 抗体半衰期与 Fc 工程
> 发布版（六节完整版）。
1. Biology
FcRn（neonatal Fc receptor）是 FCGRT 与 β2-微球蛋白的异二聚体，通过pH 依赖结合决定 IgG 半衰期：内涵体酸性环境（pH 6.0–6.5）结合 IgG-Fc，中性环境（pH 7.4）释放——这一再循环使 IgG 半衰期约 21 天。Fc 工程改造本质是调节这个 pH 开关。
- 绑定：pH 6.0 结合，pH 7.4 释放
- 关键评价：pH 6.0 亲和力 + pH 7.4 解离速率（半衰期相关）
- 相关策略：YTE、LS、Abdeg 等（文献报道）
UniProt 增强（待审校）：FCGRT（P55899，365 aa）；B2M（P61769，119 aa） —— 详见 EN Hub（UniProt CC BY 4.0）。
2. Assay Design（SPR 双测量）
| 步骤 | 要点 |
|---|---|
| 捕获 | biotinylated FcRn（streptavidin）或 anti-His；低密度（Rmax 30–80 RU）防亲合性 |
| 结合 | pH 6.0 缓冲液，单体 IgG/Fc/Fab |
| 释放 | 切换 pH 7.4 测解离——半衰期相关指标 |
| 对照 | FcRn 结合缺陷突变体（I253A/H310A/H435A）阴性对照 |
详细方案：[FcRn SPR 实验设计](/content/fcRn-spr-assay)
3. Construct Selection（FcRn）
| 参数 | 选项 | 怎么选 |
|---|---|---|
| 序列 | FCGRT aa 24–297（ECD）+ B2M 全长 | 只接受异二聚体 |
| 标签 | AVI-biotin / His | 动力学 → biotinylated |
| 表达系统 | HEK293（主流） | 恒定并声明 |
| 形式 | 异二聚体（FCGRT+B2M） | COA 必须验证 |
供应商证据：异二聚体验证、pH 6.0/7.4 传感图、参照 IgG 对照。
4. Product Comparison（FcRn）
| 版本 | 适用 | 局限 | 推荐度 |
|---|---|---|---|
| biotinylated 异二聚体 | SPR/BLI 动力学（pH 双测量） | 需验证捕获活性 | ★★★★★ |
| His-tag 异二聚体 | 常规结合/ELISA | anti-His 批次差异 | ★★★★ |
| Fc-fusion FcRn | 细胞实验 | 动力学禁用（亲合性） | ★★ |
4.2 竞品对比（预填，M4 待复核）：Sino CT071-H27H-B biotinylated HPLC 验证；ACRO HEK293 SPR/BLI 多物种——价格与最新目录待询价确认。
5. Protocols
- [FcRn SPR pH 6.0/7.4 双缓冲协议](/content/fcRn-spr-protocol)（文献依据·待验证）
6. FAQ
- pH6.0 KD 相同，半衰期就一定一样吗？ 不一定——pH7.4 解离速率才是主要相关指标。
- 为什么 KD 比 datasheet 高？ 先查密度（亲合性）与缓冲液 pH，再看异二聚体完整性。
- Fc-fusion 的 FcRn 能用吗？ 动力学不行（亲合性伪影）；用单体 ECD。
下一步
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