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TIGIT / CD155 Hub — 检查点筛选的配对方案DRAFT
TIGIT / CD155 Hub — 检查点筛选的配对方案
> 发布版(六节完整版)。
1. Biology
TIGIT 是 T/NK 细胞上的抑制性检查点,主要配体为 CD155/PVR(文献报道低 nM 级亲和力),次级配体 CD112。关键:CD155 同时结合激活受体 DNAM-1(CD226)——TIGIT 与 DNAM-1 竞争同一配体。抗体筛选必须用经过验证的配对(同源、含结合数据),才能区分"靶点结合"与"交叉竞争"。
- 配体:CD155(高亲和)/ CD112(低亲和);竞争:DNAM-1
- 功能:TIGIT 抑制 T/NK 激活;阻断 = 增强抗肿瘤免疫
- 配对价值:同源一致、含验证数据、交叉反应对照
UniProt 增强(待审校):TIGIT(Q495A1,244 aa);PVR(P15151,417 aa) —— 详见 EN Hub(UniProt CC BY 4.0)。
2. Assay Design(BLI/SPR)
| 步骤 | 要点 |
|---|---|
| 捕获 | biotinylated TIGIT(低密度,防亲合性) |
| 分析物 | CD155 ECD 浓度系列(或反向) |
| 再生 | 温和再生(glycine pH 2.5–3.0 短脉冲),验证 ≥5 循环 |
| 竞争 | CD155 预孵育 anti-TIGIT / anti-CD155 → 确认阻断 |
| 交叉 | DNAM-1 竞争对照——区分特异性 |
详细方案:[TIGIT/CD155 配对工作流](/content/tigit-pair-guide)
3. Construct Selection(配对)
| 参数 | 选项 | 怎么选 |
|---|---|---|
| TIGIT 形式 | ECD 单体(His/biotinylated) | 动力学 → biotinylated |
| CD155 形式 | ECD(His/Fc) | SEC 确认单体/二聚 |
| 配对同源性 | 同一供应商 | 配对必须同源采购 |
| 物种 | human / mouse / cyno | 按靶点物种 |
供应商证据:配对双向 KD、CD155 SEC 状态、可选 CD155–DNAM-1 交叉数据。
4. Product Comparison(配对)
| 版本 | 适用 | 局限 | 推荐度 |
|---|---|---|---|
| biotinylated TIGIT + CD155 单体 | SPR/BLI 动力学 + 竞争 | 需验证捕获活性 | ★★★★★(筛选) |
| His-tag 配对 | 常规结合/ELISA | anti-His 批次差异 | ★★★★ |
| Fc-fusion 任一 | 细胞/简单结合 | 亲合性伪影 | ★★ |
4.2 竞品对比(预填,M4 待复核):Sino TIGIT 10917-H08H3 dimer + CD155 10109-H02H 均 HPLC 验证(配对数据待询价);ACRO/Novoprotein 待确认——价格待询。
5. Protocols
- [TIGIT–CD155 BLI 结合与竞争协议](/content/tigit-cd155-bli)(文献依据·待验证)
6. FAQ
- 为什么配对必须同源采购? 表达差异混入筛选排名。
- KD 应该多少? 文献低 nM 级;差 10× 以上先查密度与缓冲液。
- 必须测 DNAM-1 竞争吗? 是——"阻断 TIGIT 不阻断 DNAM-1"的抗体生物学完全不同。
下一步
- [购买 TIGIT/CD155 配对](/request?utm_campaign=hub-tigit-cd155&utm_source=site&utm_medium=organic&utm_content=cta-buy) — 预验证结合数据
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