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TIGIT / CD155 Hub — Matched Pair for Checkpoint ScreeningDRAFT
TIGIT / CD155 Hub — Matched Pair for Checkpoint Screening
> 发布版（三节：biology / assay_design / faq）。完整版（protocols / product_comparison / construct_selection）在数据验证后补充。
1. Biology
TIGIT 是 T/NK 细胞上的抑制性检查点，主要配体为 CD155/PVR（文献报道低 nM 级亲和力），次级配体 CD112（nectin-2）。关键：CD155 同时结合激活受体 DNAM-1（CD226）——TIGIT 与 DNAM-1 竞争同一配体。因此抗体筛选必须用经过验证的配对（TIGIT + CD155 同源、含结合数据），才能区分"靶点结合"与"交叉竞争"。
- 配体：CD155（高亲和）/ CD112（低亲和）；竞争：DNAM-1
- 功能：TIGIT 抑制 T/NK 激活 → 免疫逃逸；阻断 = 增强抗肿瘤免疫
- 配对价值：同源一致、含验证数据、交叉反应对照
UniProt 增强（DRAFT · 待审校）
- TIGIT（[Q495A1](https://www.uniprot.org/uniprotkb/Q495A1)，UniProt CC BY 4.0）：长度 244 aa；链/成熟区起点 -；功能：Inhibitory receptor that plays a role in the modulation of immune responses. Suppresses T-cell activation by promoting the generation of mature immunoregulatory dendritic cells (PubMed:19011627). Upon…
- PVR（[P15151](https://www.uniprot.org/uniprotkb/P15151)，UniProt CC BY 4.0）：长度 417 aa；链/成熟区起点 -；功能：Mediates NK cell adhesion and triggers NK cell effector functions. Binds two different NK cell receptors: CD96 and CD226. These interactions accumulates at the cell-cell contact site, leading to the f…
2. Assay Design（BLI/SPR）
| 步骤 | 要点 |
|---|---|
| 捕获 | biotinylated TIGIT（低密度，防亲合性） |
| 分析物 | CD155 ECD 浓度系列（或反向） |
| 再生 | 温和再生（glycine pH 2.5–3.0 短脉冲），验证 ≥5 循环活性 |
| 竞争 | CD155 预孵育 anti-TIGIT / anti-CD155 → 确认阻断 |
| 交叉 | DNAM-1 竞争对照（CD155–DNAM-1 数据）——区分特异性 |
详细方案见：[TIGIT/CD155 配对工作流与优化](/content/tigit-pair-guide)
3. Construct Selection（TIGIT / CD155 配对）
3.1 关键构建参数
| 参数 | 选项 | 影响 | 怎么选 |
|---|---|---|---|
| TIGIT 形式 | ECD 单体（His/biotinylated） | TIGIT 单体，低密度捕获保动力学 | 动力学 → biotinylated |
| CD155 形式 | ECD（His/Fc） | 可能寡聚——SEC 确认单体/二聚 | 动力学只用单体批次 |
| 配对同源性 | 同一供应商/同一表达系统 | 表达差异混入筛选排名 | 配对必须同源采购 |
| 标签组合 | TIGIT-biotin + CD155-His（或反向） | 捕获方向一致性 | 固定一套，全筛选统一 |
| 物种 | human / mouse / cyno | 结合谱不同 | 按靶点物种 |
3.2 决策树（填空式）
- 用途 = {{抗体筛选 / 靶点验证 / BsAb 交叉验证}}？
- 需要动力学？→ 是 → biotinylated TIGIT 捕获 + CD155 单体分析物
- 需要竞争/特异性？→ 加 DNAM-1 对照（CD155–CD226 数据）
- 配对来源？→ 同源采购（同一家）
3.3 供应商必须提供的证据
- [ ] 配对结合验证（SPR/BLI KD，双向）
- [ ] CD155 SEC 状态（单体/二聚）
- [ ] 可选：CD155–DNAM-1 交叉数据
4. Product Comparison（配对）
4.1 格式对比
| 版本 | 适用 | 局限 | 推荐度 |
|---|---|---|---|
| biotinylated TIGIT + CD155 单体 | SPR/BLI 动力学 + 竞争 | 需验证捕获活性 | ★★★★★（筛选） |
| His-tag 配对 | 常规结合/ELISA | anti-His 批次差异 | ★★★★ |
| Fc-fusion 任一 | 细胞/简单结合 | 亲合性伪影（动力学禁用） | ★★ |
4.2 与常见替代方案对比（已核实公开数据预填，价格与最新目录 M4 待复核）
| 维度 | 本平台（计划） | Sino (10917-H08H3 + 10109-H02H) | ACRO | Novoprotein | 差异点 |
|---|---|---|---|---|---|
| 配对验证数据 | 承诺预验证 | TIGIT dimer + CD155 ECD 均 HPLC 验证（公开目录）；配对数据需询价确认 | 需询价确认 | 需询价确认 | 同源配对倾向 Sino |
| 价格 | 待定 | 待询（M4） | 待询（M4） | 待询（M4） | — |
| 同源配对 | 承诺 | 可同源（公开目录两家产品齐全） | 需询价 | 需询价 | 同源一致性关键 |
4.3 我的推荐（一句话）
> 抗体筛选 → 同源 biotinylated 配对（TIGIT 捕获 + CD155 单体分析物），因为同源 + 预验证数据是排名可信度的前提。
6. FAQ
- Q: 为什么配对必须同源采购？ 不同供应商的表达系统/糖基化差异会混入筛选排名。
- Q: KD 应该多少？ 文献报道低 nM 级；若你的测定与 datasheet 差 10× 以上，先查密度与缓冲液。
- Q: CD155 会寡聚吗？ 可能——确认 COA 的 SEC 单体/二聚状态再跑动力学。
- Q: 必须测 DNAM-1 竞争吗？ 是——"阻断 TIGIT 但不阻断 DNAM-1"的抗体生物学完全不同。
- Q: biotinylated 版本重要吗？ 捕获方向一致、基线稳定，筛选批次间可对比。
5. Protocols
- [TIGIT–CD155 BLI 结合与竞争协议](/content/tigit-cd155-bli)（文献依据·待湿实验验证）
What next?
- [Buy TIGIT/CD155 Matched Pair](/request?utm_campaign=hub-tigit-cd155&utm_source=site&utm_medium=organic&utm_content=cta-buy) — 预验证结合数据
- [Request a Sample](/request?utm_campaign=hub-tigit-cd155&utm_source=site&utm_medium=organic&utm_content=cta-sample)
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