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B7-H3 Hub — 4Ig 跨膜靶点的抗体发现与验证DRAFT
B7-H3 Hub — 4Ig 跨膜靶点的抗体发现与验证
> 发布版（三节）。状态：第二批观察 Hero（供应风险 2/5——4Ig 天然同源二聚体，native-like 验证难度高）；先以教育内容承载，供应合格后再带货。
1. Biology
B7-H3（CD276）是 B7 家族跨膜蛋白，以 4Ig 形式（dominant）与 2Ig 形式存在（文献报道），天然形成同源二聚体。多种实体瘤高表达、正常组织低表达——ADC/BsAb 热门靶点。关键实验挑战：构象敏感——二聚状态与糖基化影响抗体结合表位。
- 形式：4Ig（dominant）/ 2Ig；天然同源二聚体
- 功能：共刺激/共抑制证据不一（文献有争议）——功能研究需谨慎
- 应用：ADC（DS-7300 类）、BsAb、IHC 伴随诊断
UniProt 增强（待审校）：PDCD1（Q15116，288 aa）；CD274（Q9NZQ7，290 aa）；CD276（Q5ZPR3，534 aa） —— 详见 EN Hub（UniProt CC BY 4.0）。
2. Assay Design（结合验证）
| 步骤 | 要点 |
|---|---|
| 捕获 | 低密度；B7-H3 ECD（4Ig）biotinylated 或 His |
| 分析物 | 候选抗体（IgG）浓度系列 |
| 构象对照 | SEC-MALS 确认二聚状态；2Ig vs 4Ig 平行对照 |
| 特异性 | B7-H4 交叉反应对照（同家族易交叉） |
| 功能 | 报告基因/细胞 assay 确认激动/阻断（先查文献方向） |
3. FAQ
- 4Ig 和 2Ig 都要测吗？ 抗体筛选建议双形式平行——部分抗体只识别其中一种（文献报道）。
- 为什么数据批次间不稳？ 二聚/糖基化批次差异——要求 SEC-MALS + 糖型说明。
- B7-H3 是激动还是抑制靶点？ 文献仍有争议——先做机制验证，勿预设。
- 什么时候需要 native-like？ 膜蛋白/构象表位研究必须；可溶性 ECD 可能漏表位。
下一步
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